產(chǎn)氣莢膜梭菌又被稱為魏氏梭菌,是革蘭氏陽(yáng)性致病菌,可以分泌4種毒素α、β、ε、ι,更具菌株分泌的毒素不同可以將產(chǎn)氣莢膜梭菌分為A、B、C、D、E共個(gè)型。其中A型和C型對(duì)豬的影響最大,C型產(chǎn)氣莢膜梭菌是引起仔豬紅痢的病原。
仔豬在3天至1周內(nèi)發(fā)病,發(fā)病急、病程短、死亡率高、中大豬有時(shí)突然死亡,常來(lái)不及治療,給養(yǎng)殖戶帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。產(chǎn)氣莢膜梭菌廣泛分布在自然環(huán)境當(dāng)中,如泥土、河水、飼料、糞便等,新生仔豬主要通過(guò)糞口途徑感染,由于新生仔豬對(duì)病原沒(méi)有抵抗能力,梭菌在腸道后端迅速大量繁殖,產(chǎn)生大量毒素和氣體,造成新生仔豬死亡。
沒(méi)有健康的母豬就沒(méi)有健康的小豬,因此在仔豬梭菌性疾病的控制必須從母豬開(kāi)始。目前國(guó)內(nèi)控制梭菌主要是在飼料中添加抗革蘭氏陽(yáng)性菌藥物或者廣譜抗生素,很少有人采取免疫的方法。由于長(zhǎng)時(shí)間使用抗生素導(dǎo)致梭菌的耐藥性顯著增加,用藥成本也隨之增加,大大降低了養(yǎng)殖的盈利能力,同時(shí)也帶來(lái)了藥物殘留超標(biāo),急需新的有效的解決方案。
克洛生是建明工業(yè)開(kāi)發(fā)的專門(mén)用于控制畜禽腸道梭菌,維持腸道平衡的益生菌,主要成分是獲得專利的枯草芽孢桿菌PB6(Bacillius subtilis PB6)?寺迳M(jìn)入動(dòng)物腸道后會(huì)迅速繁殖,產(chǎn)生表面素 (Surfactin) A和表面素B,這兩種分子體外實(shí)驗(yàn)被證明能有效抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌生長(zhǎng),克洛生在多個(gè)國(guó)家被批準(zhǔn)作為飼料添加劑用于梭菌性疾病的預(yù)防。本研究旨在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證克洛生在我國(guó)豬體內(nèi)抑制梭菌的能力,同時(shí)了解母豬梭菌感染情況,為無(wú)抗健康養(yǎng)殖場(chǎng)提供新的梭菌防控選擇方案。
試驗(yàn)方法
試驗(yàn)最先在沒(méi)有使用克洛生的情況下檢測(cè)懷孕母豬和哺乳母豬糞便中梭菌的含量,檢測(cè)結(jié)束后將克洛生拌料飼喂試驗(yàn)?zāi)肛i,添加劑量為200克/噸。在飼喂含克洛生飼料12天后分別采集所有試驗(yàn)?zāi)肛i的糞便,檢測(cè)梭菌的含量。
梭菌含量檢測(cè)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,在第4小時(shí)讀一次結(jié)果,第5小時(shí)讀一次結(jié)果用于判定母豬梭菌感染情況
如果糞便中梭菌含量越高,在培養(yǎng)的過(guò)程中相同時(shí)間繁殖出的產(chǎn)氣莢膜梭菌就越多,代謝產(chǎn)生的硫化氫也更多,因此生成的硫化亞鐵也會(huì)相應(yīng)增加,同理產(chǎn)生相同量黑色沉淀菌含量越高所需的時(shí)間也就越短。因此可以根據(jù)培養(yǎng)過(guò)程中開(kāi)始產(chǎn)生黑色的時(shí)間以及量來(lái)判定糞便中產(chǎn)氣莢膜梭菌的含量
表1:梭菌含量與顏色反應(yīng)的關(guān)系
試驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)變色情況初步判斷母豬感染梭菌的情況十分嚴(yán)重,因此所有母豬使用添加克洛生200克/噸的飼料進(jìn)行飼喂,從2013年5月14日開(kāi)始到2013年5月25日,一共12天。采集相同懷孕母豬和哺乳母豬糞便檢查梭菌含量。圖1-C、1-D為飼喂克洛生后20頭哺乳母豬4小時(shí)梭菌檢測(cè)顯色結(jié)果,圖2-C、2-D為飼喂克洛生后20頭哺乳母豬5小時(shí)梭菌檢測(cè)顯色結(jié)果,圖3-B、4-B分別為為飼喂克洛生后5頭懷孕母豬4小時(shí)和5小時(shí)梭菌檢查顯色結(jié)果。從圖上可以看出在飼喂克洛生后試管變黑的數(shù)量和程度明顯下降。
分析和討論
中國(guó)豬場(chǎng)母豬攜帶梭菌的情況并不清楚,本研究利用梭菌檢測(cè)試劑盒對(duì)豬場(chǎng)梭菌含量進(jìn)行調(diào)查。被檢測(cè)的25頭母豬中有18頭梭菌超標(biāo),嚴(yán)重感染的懷孕母豬和哺乳母豬分別達(dá)到75%和60%,提示母豬攜帶梭菌較為普遍,對(duì)母豬感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(表2所示)。在使用克洛生12天后再次檢測(cè)可以看出嚴(yán)重感染的懷孕母豬和哺乳母豬從總數(shù)11頭減少到2頭,總計(jì)減少9頭,改善率81.3%。輕度感染母豬由7頭減少到3頭,減少4頭,改善率達(dá)到57.1%。
改善最明顯的是哺乳母豬,使用克洛生后3頭母豬全部從重度感染變?yōu)檎,改善率達(dá)到100%。其中輕度感染母豬變化看上去不如重度感染母豬變化明顯,可能是因?yàn)樵瓉?lái)重度感染母豬,使用克洛生后從重度感染變成了輕度感染,掩蓋了克洛生對(duì)輕度感染梭菌母豬的治療效果。飼喂含克洛生200克/噸飼料12天后所有母豬梭菌超標(biāo)情況由18頭變?yōu)?頭,有13頭母豬恢復(fù)正常,治療有效率達(dá)到72%。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明克洛生可以有效減少豬腸道中的梭菌,改善動(dòng)物健康狀態(tài),這與國(guó)外發(fā)表的文章結(jié)果一致,也與克洛生體外抑制梭菌的結(jié)果一致。
表2. 母豬使用克洛生前后梭菌攜帶情況統(tǒng)計(jì)
結(jié)論
通過(guò)母豬糞便梭菌檢測(cè)表明母豬普遍攜帶梭菌,且大多數(shù)母豬梭菌含量超標(biāo),是仔豬梭菌性疾病的主要來(lái)源?寺迳砑拥斤暳现心茱@著降低梭菌在豬腸道內(nèi)的含量,保證豬群健康。
作者:張媛媛(建明中國(guó)客戶服務(wù)實(shí)驗(yàn)室)